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內(nèi)毒素在細(xì)胞內(nèi)的解毒和清除中的內(nèi)化案例介紹(一)

發(fā)布時(shí)間: 2023-07-05  點(diǎn)擊次數(shù): 709次

Hampton等用巨噬細(xì)胞系RAW264.7細(xì)胞株研究LPS的內(nèi)化過程。他們先將LPS加入培養(yǎng)基,使培養(yǎng)基內(nèi)毒素濃度在納摩爾每升水平,然后加入RAW264.7細(xì)胞使其吸收4'-單磷酸脂質(zhì)AA。在細(xì)胞攝取脂質(zhì)AA的同時(shí)伴隨著溶酶體發(fā)生去磷酸化反應(yīng),產(chǎn)生4'單磷酸脂質(zhì)AA。后者的生物學(xué)活性顯著降低,該實(shí)驗(yàn)證實(shí)了LPS進(jìn)行去磷酸化反應(yīng)的分解代謝促使其毒性下降。可見,在溶酶體中發(fā)生LPS的解毒效應(yīng)有兩種:①發(fā)生脫?;"诎l(fā)生去磷酸化。失去一定成分的LPS無法引出信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)效應(yīng),所以機(jī)體通過對(duì)LPS進(jìn)行酶解使其失去毒性。

7.3內(nèi)毒素在細(xì)胞內(nèi)的解毒和清除中的內(nèi)化案例介紹(一).png

細(xì)菌LPS進(jìn)入單核細(xì)胞可通過CD14依賴的途徑,存在有兩種方式,但大多數(shù)通過非網(wǎng)格蛋白參與的形式來完成。CD14結(jié)合LPS可以通過網(wǎng)格蛋白包被小窩(clathrin-coated pits)進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),也可以如同其他GPI錨定蛋白一樣以非包被內(nèi)陷(uncoatedinvagination)形式完成內(nèi)化反應(yīng)。進(jìn)入酸性的細(xì)胞內(nèi)腔室后,脂質(zhì)A部分被分解,失去其生物學(xué)活性。用染色標(biāo)記技術(shù)證實(shí),LPS可以由吞噬細(xì)胞將其從細(xì)胞膜上轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞內(nèi)小泡內(nèi),表現(xiàn)出多種特性。在巨噬細(xì)胞中,LPS可以到達(dá)核周區(qū)域,該區(qū)為高爾基體停泊處。

許多證據(jù)顯示:內(nèi)化的LPS需經(jīng)歷酶學(xué)分解和物理隔離(physical sequestration)兩個(gè)處理過程,這些過程可以削弱LPS的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)作用。LPS誘導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)效應(yīng)本身可以調(diào)節(jié)其加工過程,例如LPS激活的巨噬細(xì)胞中LPS可以下調(diào)自身的去磷酸化反應(yīng)。在LPS 反應(yīng)低下的C3H/HeJ品系小鼠中,Thieblemont 等發(fā)現(xiàn)巨噬細(xì)胞對(duì)LPS和神經(jīng)酰胺的內(nèi)吞攝取能力存在缺陷。

一些實(shí)驗(yàn)顯示,在LPS信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)之前,LPS必須存在于細(xì)胞內(nèi)小泡中,而其他實(shí)驗(yàn)則認(rèn)為LPS經(jīng)歷內(nèi)化不涉及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),這種分歧的產(chǎn)生可能是由于未充分考慮到所用的干擾細(xì)胞活動(dòng)的試劑對(duì)細(xì)胞的其他生物學(xué)功能所帶來的負(fù)面影響。如腺嘌呤受體2X7purinergic receptor 2X72X7)在LPS的激活效應(yīng)中起著基本的作用,不能排除上述實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用的試劑對(duì)2X7存在一定影響。

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