早在1987年,Palmer 等人即揭示了EDRF的許多生物活性是由一氧化氮承擔(dān)的,E-DRF與一氧化氮兩者在溶液中有相似的半衰期,兩者均在酸性環(huán)境中穩(wěn)定,在氧原子及超氧化離子存在的情況下自動(dòng)激活;兩者均為親脂性,易于滲透過(guò)生物膜;均與血紅蛋白發(fā)生反應(yīng),并激活鳥嘌呤環(huán)化酶從而提高環(huán)磷酸鳥苷的水平;抑制血小板聚集和血小板與內(nèi)皮細(xì)胞表面的黏附,擴(kuò)張動(dòng)靜脈平滑肌和表現(xiàn)出細(xì)胞毒活性。因此推斷兩者是同一物質(zhì)。
由左旋精氨酸合成一氧化氮和左旋瓜氨酸的過(guò)程廣泛存在于血管內(nèi)皮細(xì)胞、活化的巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和血小板等許多種細(xì)胞中。其前體可由食物攝取或經(jīng)過(guò)肝臟鳥氨酸循環(huán)和內(nèi)皮細(xì)胞從左旋瓜氨酸合成,提示這是個(gè)循環(huán)過(guò)程。該過(guò)程受制于左旋谷氨酸鹽,由左旋精氨酸合成NO的途徑如圖15-1所示。它涉及末端胍基氮的氧化,受NO合成酶控制。
這些酶是根據(jù)它們是誘導(dǎo)酶還是合成酶以及它們的輔因子來(lái)分類的。合成酶存在于內(nèi)皮細(xì)胞和腦組織,但不存在于巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞,必須與鈣離子、鈣調(diào)蛋白、NADPH同時(shí)存在才能發(fā)揮作用。一氧化氮合成的激活可發(fā)生在合成細(xì)胞本身或遠(yuǎn)離合成細(xì)胞的其他細(xì)胞,激活的結(jié)果是可溶性鳥嘌呤環(huán)化酶的激活使cGMP產(chǎn)量增加,通過(guò)刺激內(nèi)質(zhì)網(wǎng)攝取鈣離子或增加細(xì)胞膜鈣離子ATP酶活性和(或)抑制鈣離子內(nèi)流入胞使鈣離子排出增加,從而降低細(xì)胞質(zhì)鈣離子濃度,以及激活蛋白激酶,使血管松弛。
左旋精氨酸-一氧化氮途徑可被左旋精氨酸含NG的類似物抑制,這些類似物包含NG-甲基-左旋精氨酸(L-NMMA);NG-硝基-左旋精氨酸(L-NA)及其甲基脂化物NG-硝基-左旋精氨酸甲基脂化物(L-NAME),一般認(rèn)為它們具有立體結(jié)構(gòu)及專一性,是濃度依賴的競(jìng)爭(zhēng)性拮抗劑,盡管目前有證據(jù)表明在一些細(xì)胞其抑制作用已不可逆,但它們?nèi)晕幢粡V泛應(yīng)用于研究該途徑在細(xì)胞功能中的作用。
由于L-NMMA在內(nèi)皮細(xì)胞中可被轉(zhuǎn)化為左旋瓜氨酸從而成為合成左旋精氨酸的底物,因而使情況變得更為復(fù)雜。一氧化氮的產(chǎn)生對(duì)血管反應(yīng)性的喪失起主要作用,最后不可避免地造成多器官功能衰竭直至死亡。